单细胞测序技术正在革命性地推动我们对生命复杂性的认知，然而其高昂的每样本成本和技术复杂性，限制了其在更多实验室和更广泛物种中的普及。尽管多重样本标记技术能有效“降本增效”，但现有的方法往往受限于表面抗原种群特异形、寡核苷酸装饰的成本高或操控步奏冗杂。近日，南方海洋科学与工程广东实验室（广州）的陈凯专家教授项目团队在Journal of Genetics and Genomics上发表了一项创新性方法学研究，提出了一种名为HEATag的新型样本标记策略，为我们提供了一个低代价、跨动物群、全服务平台兼容的全新解决方案。

学术期刊介绍

Journal of Genetics and Genomics (JGG)是由我们完美院显性基因的与成长怪物学探讨所和我们显性基因的直到学员学会主办方的新国际学界中文核心学术期刊杂志杂志，锐意创新于报道怎么写健康完美和医学检验显性基因的学教育邻域的原创设计性探讨工作成效。JGG 202几年度影响力细胞因子7.1，Scopus学界中文核心学术期刊杂志杂志评定技术指标CiteScore 9.9，稳居JCR 202几年度GENETICS & HEREDITY教育邻域Q1区(Top 10%)，BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY教育邻域Q1区，稳居我们完美院中文核心学术期刊杂志杂志分离怪物学几类1区(Top中文核心学术期刊杂志杂志)，显性基因的学和生化学与碳原子怪物学小类双1区。

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甚么是HEATag

得当的“二一体化”规划

HEATag是由凝集素和HUH内切酶分为的整合蛋清

「定位功能器」功能模块 - 凝集素

能够识别细胞膜上广泛存在且高度保守的糖基化装饰（如GlcNAc和Neu5Ac）。

「对接器」控制模块 - HUH内切酶

可以序列特异性地与普通的、无需化学修饰的单链DNA（ssDNA）字段长条型码做好共价进行连接。

“1+1>2”的功能：将两者融合，得到的HEATag蛋白既能通过凝集素牢牢锚定在细胞膜上，又能通过HUH蛋白携带特定的DNA条形码进行模板标注与可追溯。

Fig1: HEATag很多符号目的构造图

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实际战斗检定

HEATag现在有能开打？

可能在各种不同能力下，保持喂母乳植物组织系单组织混样测序

实验室里的设计再精妙，也要经过真实样本的 “实战考验” 才算数。科研微商团队为 HEATag 安装了多轮 “有压力各种测试”，从神经生殖细胞系到神经生殖细胞质，从恒温到高湿，从新鲜范本到固定不动范本，全多方面认可它的保持稳判定和可信度性。

1轮测评面对辅乳动植物组织系：探究人选购了来于人、鼠、仓鼠五个种类的四个组织（HEK293T、K562、MEF、CHO），在环境温度使用 HEATag 记号后搭配测序。决定回笼的 11447 个组织中，85.66% 都能能够 HEATag 长商品条码更准输入到原种类，子样本间交叉重合生态破坏特少，UMAP 聚类讲解讲解更加会直接说明，HEATag 长商品条码与种类特情人基因组组的特点极高相符。 立刻，测试方法必要能力进这一步优化：钻研者试过在 4℃下记号优质松茸体血内部、在常温下记号甲醇统一住体血内部，恐怕单独记号体血内部核。結果一如既往显眼：所有必要能力下，范本标识与鱼类的信息均兼备非常好的有关性，切分合理率超 95%。尽管甲醇统一住会引发稍微的转录本穿插的污染，体血内部核化学合成可能会有一定量 RNA 浪费，体血内部品类的批注結果一如既往与优质松茸范本长期保持同步，证实 HEATag 能记号各个处置必要能力下的实验所范本。

Fig2: HEATag 可在差异先决条件下完毕单内部转录组混样介绍

就可以标出母乳喂养各种动物界和海洋环境无脊椎骨各种动物界的原代细胞核

假如说肿瘤体细胞系检测是 “条件题”，那公司模板也就是 “扩展题”， 那些模板并不是因肿瘤体细胞类麻烦、环保顺应性层次性，当上标识技術的 “困难”，而 HEATag 刚好在那些 “困难” 上展现出了优势与劣势。

研究团队选择了大鼠和小鼠的睾丸公司，这类样本包含精原干细胞、精母细胞、精子细胞等多种类型，对标记一致性的要求极高。实验中，两种动物的睾丸用特异性 HEATag 条形码标记后混合测序，最终获得的 14663 个细胞并不是能被精确性辨认，大部分其主要细胞膜类行的聚类算法结杲都清淅可辨。

更令人惊喜的是HEATag对海洋环境生物技术的兼容性。HEATag能在海水的等渗溶液中标记新鲜的海洋动物细胞（如海月水母、大西洋海刺水母）。研究人员用人工海水稀释的HEATag 标记了水母和珊瑚的组织细胞后在 BD Rhapsody 平台测序，最终回收的 6452 个细胞中，HEATag 条状码与种类转录组具备有较高不一样性，不存在诞生因高盐工作环境导至的 “标志生效”。后续对甲醇固定的海洋生物细胞测试结果显示，HEATag 在固定样本中的拆分效果优于新鲜样本。

Fig3: HEATag 可达成喂奶生物机构子样本各种方面 scRNA-seq 阐述

Fig4: HEATag可做到新鲜毛肚海洋环境无脊柱软体动物众多 scRNA-seq 分析一下

HEATag与内部的相结合会促使转录组的相关性转换

对样本标记技术来说，“不影响样本本身的 RNA 特征” 是底线。研究团队将来自同一供体的等量的 HEATag 标记细胞与未标记细胞混合测序，对比两者的 RNA 质量、基因捕获数量和细胞组成。结果显示，标记组与未标记组的 RNA 质量没有明显差异，捕获的基因数量基本持平，UMAP 图谱显示两组样本的细胞组成高度相似，转录相似性更是维持在高位。无论是细胞簇的注释结果，还是不同细胞类型的基因回收数量，两组都几乎一致，没有出现 “标记导致的基因表达异常”。这意味着，HEATag在进行记号人物的另外，没对以后的转录类物质析引致不干扰，衡量了钻研数据文件的真人性。

Fig5: HEATag都不会直接影响样表的 RNA 抒发格局

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之后可期

HEATag 能为单人体细胞分析引致啥子？

HEATag 的价值量，远禁不住于 “来解决标记符号问题”，它的利索性和普遍意义，也在为单细胞系调查开启越多概率较高性

从拜谱生物不一样看

HEATag 能遮盖从 “简单易行非常讲解”（如癌结构与正常情况下结构、治疗药物除理与参考）到 “大企业企业规模探析分析”（如结构血细胞膜图谱绘出、高通芯片量需求分析）的全范围图需求分析。随 PIP-seq、Stereo-cell 等新可初始化技能的发展趋势，HEATag 还能进一部升降单血细胞膜探析分析的通量，助力器科技研究技术团队实施很大企业企业规模的工程项目。

从跨行业潜质一起来看

HEATag 这不仅采在转录组学，还能与表观dna组学、淀粉酶质组学、前景组学等高系统搭配，按照订制目录和寡核苷酸编码序列，HEATag 会枯燥结合其他的组学步奏，不直接影响手机信号驯服高度。同时，对于HEATag还会提升单细胞系糖组学科学研究高系统。

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企业合作动态的

拜谱动物与陈凯教受制定目标开始合作协议意项

值当私信的是，在 HEATag 新技巧体显现出出庞大适用前景的环境下，拜谱海底物理学体已与华南地区海上科学学与本职工作江西科学实验操作室内（佛山）陈凯老师确立逐项企业合作有意向。当事人计划表围绕着 HEATag 新技巧的工业化化执行、成果转为转为等导向展平淬硬层协调，促进推动某些低投入、跨植物物种的单人体生殖细胞核符号新技巧快一点适用于实际效果成果转为情境，为更加多科学实验操作室内保证高效率、经济社会的单人体生殖细胞核论述产品，动力成果转为本职工著者在人体生殖细胞核海底物理学体学、海上海底物理学体学、消化道疾病体制等领域行业拥有更加多冲刺